首先,我們回顧一下NGS的基本流程:樣本收集—核酸提取—文庫構(gòu)建—文庫質(zhì)檢—上機(jī)測(cè)序—數(shù)據(jù)驗(yàn)證;我們?cè)谶M(jìn)行NGS實(shí)驗(yàn)的過程中,往往需要對(duì)中間或*終的核酸文庫進(jìn)行質(zhì)控。
目前主流的方法有3種:紫外吸收法、熒光光度法(Qubit)和qPCR方法!
紫外吸收法是較為傳統(tǒng)的核酸濃度定量方法,簡(jiǎn)單快速,成本低廉,但其無法特異性區(qū)分DNA、RNA或蛋白質(zhì)。并且,紫外分光光度計(jì)的靈敏度不足,無法完成低濃度DNA和RNA的**定量。
qPCR法**度高,靈敏度高,特異性強(qiáng),需要配制PCR反應(yīng)體系,儀器運(yùn)行時(shí)間約1-2 h。
熒光光度法(Qubit)使用熒光染料結(jié)合核酸,操作較為簡(jiǎn)便,濃度測(cè)定更為精準(zhǔn)和靈敏。快速的檢測(cè)流程和包含的定量軟件使其成為文庫常規(guī)定量的理想選擇。
Qubit:Thermo Qubit熒光儀作為業(yè)內(nèi)的金標(biāo)準(zhǔn),能快速、準(zhǔn)確、靈敏、特異性地定量DNA、RNA和蛋白質(zhì)。Qubit 4 熒光儀采用專門研制的熒光檢測(cè)技術(shù)和熒光染料,這些熒光染料只有與特異性的靶分子結(jié)合時(shí),才能發(fā)射熒光信號(hào),即使有游離核苷酸或降解核酸存在,這些染料仍能發(fā)揮作用。Qubit 4 熒光定量即便在低濃度下亦具有目前**的 DNA 和 RNA 定量特異性和靈敏度。
杭州沃森生物提供NGS全流程產(chǎn)品優(yōu)化方案,本篇帶你了解Qubit儀器/試劑/耗材!
Qubit 儀器
Qubit 4 熒光儀和Qubit flex 熒光儀的區(qū)別和檢測(cè)原理
Qubit 試劑耗材
Qubit試劑耗材選擇指南(Thermo/麥伯)
備注:以上試劑耗材搭配使用,適配ThermoFisher Qubit 4 熒光儀、Qubit Flex 熒光儀!
Qubit 熒光儀與Qubit試劑耗材搭配使用,可在廣泛的濃度范圍內(nèi)對(duì)DNA、RNA進(jìn)行特異性定量,對(duì)常規(guī)分析和稀有珍貴樣品都適用。
如果您的實(shí)驗(yàn)室需要更高通量,更高準(zhǔn)確度和可靠性的核酸定量,杭州沃森生物為您提供Qubit 熒光儀與Qubit試劑耗材整體方案,滿足您獲得高度準(zhǔn)確可靠、靈敏且特異的結(jié)果。
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