生物制品（包括重組蛋白藥、抗體藥、疫苗等）多是使用非人源的連續(xù)傳代菌株或細(xì)胞株來(lái)表達(dá)生產(chǎn)，即使經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的純化工藝仍然容易在成品中殘留宿主細(xì)胞的核酸片段。這些外源性核酸殘留可能存在諸多安全隱患（如感染性、致瘤性、免疫原性和致突變性）。
《中國(guó)藥典》（2020年版三部通則3047）規(guī)定：細(xì)胞基質(zhì)生產(chǎn)的生物制品DNA殘留量不高于100 pg/劑；細(xì)菌或真菌基質(zhì)生產(chǎn)的制劑DNA殘留量不超過(guò)10 ng/劑。
《中國(guó)藥典》將定量qPCR法作為生物制品宿主殘留DNA檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。定量qPCR法具有序列特異性高、靈敏度高、重現(xiàn)性好，定量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，目前已經(jīng)成為宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)的主流方法之一。
TIANGEN聚焦生物制藥上游環(huán)節(jié)，結(jié)合自身在國(guó)內(nèi)核酸提取和純化領(lǐng)域多年積攢的豐富經(jīng)驗(yàn)，自主研發(fā)推出生物制品宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)整體解決方案：
● 磁珠法宿主殘留DNA提取試劑盒（HD101）
● Vero殘留DNA檢測(cè)試劑盒（探針qPCR法）（HD201）
● CHO殘留DNA檢測(cè)試劑盒（探針qPCR法）（HD202）
磁珠法宿主殘留DNA提取試劑盒
目錄號(hào)：HD101
適用于生物制品樣本的前處理，可用于分離純化高質(zhì)量宿主細(xì)胞殘留DNA，并可與其他宿主殘留DNA檢測(cè)試劑盒配合使用。1. 操作靈活：可手工提取或搭配TGuide S32 Pro全自動(dòng)核酸提取純化儀使用
2. 通用性強(qiáng)：可滿足高/低pH、高鹽、高蛋白等復(fù)雜樣品的核酸提取
3. 準(zhǔn)確靈敏：回收率在70%-130%，可純化富集低至fg級(jí)別的DNA
4. 快速高效：操作步驟簡(jiǎn)單，1h即可完成整個(gè)流程
優(yōu)異的加標(biāo)回收率表現(xiàn)
圖2.模擬樣本的提取結(jié)果
所有模擬樣本計(jì)算得到的加標(biāo)回收率均介于70%-130%之間，符合《中國(guó)藥典》要求（50% - 150%）。
實(shí)驗(yàn)例2
圖3. 3款宿主細(xì)胞DNA殘留提取產(chǎn)品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比
三款提取產(chǎn)品的加標(biāo)回收率均滿足《中國(guó)藥典》的要求（50%-150%），HD101相比競(jìng)品，在2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度下的加標(biāo)回收率值更高，CV值更穩(wěn)定。
探針qPCR法檢測(cè)試劑盒
目錄號(hào)：HD201, HD202
| Vero殘留
DNA檢測(cè)試劑盒
目錄號(hào)：HD201
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CHO殘留
DNA檢測(cè)試劑盒
目錄號(hào)：HD202
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適用于通過(guò)qPCR方法檢測(cè)各種生物制品（中間品、半成品和成品）中宿主細(xì)胞殘留DNA的含量。
1. 檢測(cè)線性范圍廣：Vero細(xì)胞**檢出限至1 fg，CHO細(xì)胞檢出限至5 fg
2. 檢測(cè)準(zhǔn)確，重復(fù)性好：選用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，試劑批間、批內(nèi)穩(wěn)定
3. 專屬性強(qiáng)：受其他物種干擾值低，無(wú)交叉反應(yīng)
4. 耐用性強(qiáng)：DNA碎片化不影響檢測(cè)結(jié)果；儀器通用性強(qiáng)
5. 操作簡(jiǎn)單快速：1h內(nèi)即可完成qPCR驗(yàn)證
兩款試劑的qPCR結(jié)果線性化良好，線性范圍廣，擴(kuò)增效率接近****。
圖4. HD201和HD202對(duì)目標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品的qPCR擴(kuò)增曲線
兩款試劑檢測(cè)目標(biāo)宿主細(xì)胞DNA的qPCR擴(kuò)增曲線重疊性高，反應(yīng)體系專屬性強(qiáng)，抗外源物種基因組片段干擾能力強(qiáng)。
圖5. 外源基因組干擾下HD201和HD202的qPCR擴(kuò)增曲線
DNA碎片化處理下檢測(cè)結(jié)果依舊準(zhǔn)確
兩款試劑的qPCR擴(kuò)增曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線同對(duì)照相比，重疊性都很好，定量檢測(cè)結(jié)果不受影響。
圖6. HD201和HD202對(duì)片段化Vero和CHO DNA的qPCR擴(kuò)增曲線
與同類(lèi)競(jìng)品相比，HD201對(duì)于超低豐度Vero DNA的定量qPCR結(jié)果更準(zhǔn)確，CV值更穩(wěn)定。
圖7. 2款檢測(cè)產(chǎn)品對(duì)Vero DNA標(biāo)準(zhǔn)品定量檢測(cè)的結(jié)果對(duì)比
與同類(lèi)競(jìng)品相比，HD202對(duì)不同濃度CHO DNA樣本的qPCR結(jié)果都表現(xiàn)出更加良好的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。
圖8. 3款宿主殘留DNA檢測(cè)產(chǎn)品對(duì)CHO DNA標(biāo)準(zhǔn)品定量檢測(cè)的對(duì)比結(jié)果
后續(xù)TIANGEN還將陸續(xù)推出E.coil、人源細(xì)胞系等宿主細(xì)胞的檢測(cè)產(chǎn)品，敬請(qǐng)期待。
